小鼠单核巨噬细胞需要怎样的培养条件？

　　小鼠单核巨噬细胞是机体重要的免疫细胞，具有抗感染、抗肿瘤和免疫调节等重要作用。①抗感染：非特异性吞噬杀伤多种病原微生物，是机体非特异性免疫防御中的重要细胞。②提呈抗原、启动免疫应答：在特异性免疫应答中，绝大多数TD抗原（胸腺依赖抗原）都需经巨噬细胞吞噬和加工处理，并与其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC复合物，表达在细胞膜表面，提呈给T细胞。巨噬细胞表面有很多黏附分子，可与T细胞表面的协同刺激分子受体结合，产生协同刺激信号，诱导T细胞的活化，启动免疫应答。③抗肿瘤：巨噬细胞被某些细胞因子如IFN-γ激活后能有效地杀伤肿瘤细胞，是参与免疫监视的重要效应细胞。④免疫调节：在特异性免疫应答中，巨噬细胞可分泌释放多种细胞因子，参与免疫调节。

　　

　　小鼠单核巨噬细胞具有较广泛的造血活性，可刺激中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞的增殖、分化和功能活性。主要用于肿瘤化疗或放疗引起的粒细胞减少。用于异体或自体骨髓移植，加速骨髓功能恢复，亦用于骨髓异常增生综合征。

　　

　　小鼠单核巨噬细胞的培养环境与一般贴壁细胞并无差异。即培养箱温度为37℃，CO2浓度为5%。推荐的培养基为DMEM+10%的胎牛血清；实际上，经研究者们实验发现高糖型DMEM培养的RAW264.7细胞传代后贴壁更快、细胞生长速度更快。因此，推荐使用高糖型DMEM，FBS浓度为10%，作为RAW264.7细胞的培养基。

　　

　　关于RAW264.7细胞的传代方法，ATCC推荐使用细胞刮刀。也可采用0.25%的胰酶消化或采用弯嘴吸管吹打等方法。采用细胞刮刀进行传代时，细胞能较大限度被收集起来，但会对细胞造成机械性损伤、影响细胞形态及贴壁时间等。采用胰酶消化时，由于RAW264.7细胞贴壁较牢，消化时间就较长。但消化时间点不易把握，易消化过度，对细胞生长造成抑制。