文献解读 | J Exp Med发现NK细胞抑制肝纤维化的作用及机制

肝炎病毒感染、酒精性或非酒精性脂肪性肝炎和胆道梗阻都会造成慢性肝损伤，使肝脏发生病理性的纤维化，进而诱发肝纤维化的发生，最终导致肝硬化和肝功能衰竭。在肝纤维化进程中，活化的肝星状细胞在肝脏中沉积是肝纤维化发生的中心环节。

前列腺素是由花生四烯酸经过环氧合酶和前列腺素合成酶的连续反应而得到的具有生物活性的脂类，其中前列腺素E2在免疫调节过程中发挥着双重作用，这种双重作用的产生或许与前列腺素E2的不同受体有关，但在肝纤维化过程中，前列腺素E2对于NK细胞的调节作用并不明确。 

鉴于此，天津医科大学基础医学院申毓军教授课题组最近报道了前列腺素E2受体EP3介导NK（natural killer）细胞粘附与杀伤肝星状细胞，从而缓解肝纤维化的作用及机制，相关研究成果于2022年5月2日在线发表在J Exp Med， 题目为EP3 enhances adhesion and cytotoxicity of NK cells toward hepatic stellate cells in a murine liver fibrosis model。

图1. 该研究发表于国际期刊J Exp Med

该课题组分别使用CCL4腹腔注射和胆管结扎两种不同的手段对小鼠进行肝纤维化造模，发现肝纤维化小鼠的EP3受体的表达下调，并且在NK细胞中敲降或敲除EP3受体可抑制NK细胞对于肝星状细胞的粘附和杀伤作用，加重肝纤维化。

图2. 使用CCL4造成小鼠肝纤维化模型，同时设置Oil对照组。在敲除EP3后显著加重了小鼠的肝纤维化。上：HE染色，下：天狼星红染色

同时该团队发现NK细胞特异性敲除EP3受体后显著降低了双阳NK细胞的数量和比例，后续实验发现正是双阳NK细胞改善了肝纤维化进程。通过分析双阳NK细胞的单细胞测序结果，发现敲除EP3受体显著降低了双阳NK细胞中Itga4的表达，进而削弱了与肝星状细胞的粘附杀伤过程，加重了肝纤维化进程。

图3. 单细胞测序结果显示，敲除EP3后降低了CD11b+CD27+双阳NK细胞中粘附基因Itga4、Tln1、Dock2、Itgb1和Myh9的表达

另一方面，通过SCENIC分析，发现转录因子Spic可能参与了EP3对于Itga4的调节作用，同样在NK92MI细胞中Spic也受到EP3的调控作用。

图4. EP3激动剂Sulprostone刺激NK92MI细胞中转录因子Spic的入核，同时EP3抑制剂L-798,106抑制了Spic的入核

最终发现EP3受体偶联Gq蛋白后，激活PKC，磷酸化Spic，促进Spic入核，增强对Itga4的调控作用。该研究揭示了在肝纤维化进程中，PGE2通过EP3受体调控NK细胞，促进与肝星状细胞的粘附杀伤过程，表现出抗纤维化的作用，在NK细胞中激活EP3可能成为新的治疗肝纤维化的策略。

图5. 文章通路图