磷酸盐缓冲液(PBS)的配制方法因其所需pH值的不同而有所差异。以下是一些常见pH值的磷酸盐缓冲液的配制方法:
一、pH值为2.0、2.5和5.0的磷酸盐缓冲液
pH 2.0的磷酸盐缓冲液
甲液:取磷酸16.6mL,加水至1000mL,摇匀。
乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加水溶解成1000mL。
混合:取甲液72.5mL与乙液27.5mL混合,摇匀。
pH 2.5的磷酸盐缓冲液
取磷酸二氢钾100g,加水800mL,用盐酸调节pH至2.5,再用水稀释至1000mL。
pH 5.0的磷酸盐缓冲液
取一定量的0.2mol/L磷酸二氢钠溶液,用氢氧化钠试液调节pH至5.0。
二、pH值在5.8至7.8之间的磷酸盐缓冲液
pH 5.8的磷酸盐缓冲液
取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水溶解成1000mL。
pH 6.5的磷酸盐缓冲液
取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2mL,用水稀释至100mL。
pH 6.6的磷酸盐缓冲液
取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水溶解成400mL。
pH 6.8的磷酸盐缓冲液(含胰酶)
取磷酸二氢钾6.8g,加水500mL溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至6.8;
取胰酶10g,加水适量溶解,将上述两液混合后,加水稀释至1000mL。
或者取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250mL,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118mL,用水稀释至1000mL,摇匀。
pH 7.0的磷酸盐缓冲液
取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1mL,用水稀释至100mL。
pH 7.2的磷酸盐缓冲液
取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50mL与0.2mol/L氢氧化钠溶液35mL,加新沸过的冷水稀释至200mL,摇匀。
pH 7.3的磷酸盐缓冲液
取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水溶解成1000mL,调节pH值至7.3。
pH 7.4的磷酸盐缓冲液
取磷酸二氢钾1.36g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液79mL,用水稀释至200mL。
pH 7.6的磷酸盐缓冲液
取磷酸二氢钾27.22g,加水溶解成1000mL,取50mL该溶液,加入0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4mL,再加水稀释至200mL。
pH 7.8的磷酸盐缓冲液
方法一:取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解并稀释至500mL;取磷酸二氢钠2.76g,加水溶解并稀释至100mL;取上述甲液91.5mL与乙液8.5mL混合,摇匀。
方法二:取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g,加水溶解成1000mL。